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弓形虫的诊断

时间:2014-01-28 14:30来源:草原半亩地 作者:秩名 点击:我要投稿
猪弓形虫的临床症状、剖检变化和很多疾病相似,在新疫区往往容易误诊,为了确诊需采用病原检查和血清学诊断。
1.病原检查
(1)脏器涂片检查:可将肺、肝、淋巴结等作涂片标本检查,其中以肺脏的涂片因背景清晰,检出率较高。涂片标本自然干燥后,甲醇固定,姬氏或瑞氏染色检查。
(2)动物接种:小白鼠、家兔等实验动物对弓形虫有高度的敏感性。取病猪的肺、肝、淋巴结等研碎加10倍生理盐水每ml加青霉素1000单位和链霉素100mg在室温下放置1h,接种前振荡,待重颗粒沉底后,取上清液接种于小白鼠的腹腔,每只接种0.5~1.0ml。接种后观察20天,若小白鼠出现被毛粗乱、呼吸迫促的症状或死亡,取腹腔液或脏器作涂片染色镜检。初代接种的小鼠可能不发病,可用被接种小鼠的肝、淋巴结等组织按上述方法制成乳剂盲传3代,可能从病鼠腹腔液中发现弓形虫的速殖子。
2.血清学诊断
国内外已研究出多种血清学诊断法供流行病学调查和生前诊断用。由于血清学阳性只能说明该猪过去某时曾受感染,因此为了弄清是否急性感染,需在第一次采血检查后的2~4周再采血检查一次,若血清抗体滴度高于先前4~8倍即可证明为急性。也有的报告认为染色试验(DT)和间接荧光抗体法(IFAT)滴度超过或等于1∶1000时表明是急性。
(1)染色试验(DT) 这是弓形虫特有的血清学诊断法,特异性高而且被认为是标准的诊断方法。其原理是新鲜的弓形虫易被美兰着色,然而当加入含有辅助因子(AF)的新鲜正常人血清时,促使抗体与细胞浆发生作用而引起细胞浆变性,变性的虫体胞浆不能被碱性美兰着色。利用这种现象可间接地测定感染弓形虫后体内抗体的含量,以此作为本病的生前诊断。通常猪感染弓形虫后3~5天左右就可见到抗体滴度的升高。
(2)间接血凝试验(IHT)这是一种比较灵敏的诊断方法,主要用于大规模的流行病学调查,国内已在广泛应用。
其他还有IFAT、酶联免疫吸附试验(ELISA)、补体结合反应、皮内反应、抗弓形虫单克隆抗体等都曾被用作本病的诊断。
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